摘 要 非饮酒者可以从食物中吸收少量乙醇，包括代谢转化的醇类物质，但含量≤5mmol/L。乙醇的定量测定对诊断和鉴别诊断急症、抢救乙醇中毒十分重要，为交通肇事处理提供科学依据，对当前社会人群饮酒影响健康的调研及食品乙醇含量测定均有重要意义。？

　　关键词 乙醇 乙醇脱氢酶 NAD?

　　乙醇测定方法及原理？

　　乙醇+NAD，乙醇脱氢酶乙醇+NADH，在340nm波长下测定，测定每分钟NADH吸光度的增加值，其测定值（△A/分）大小与血乙醇含量成正比。方法为两点法，温度37℃，波长340nm，仪器为全自动或半自动生化分析仪，样品量50μl，试剂量600μl，反应方向为正反应。检查样本要求新鲜血清或EDTA抗凝血浆，新鲜尿液或组织液。？

　　△A样本/分？

　　计算公式：C样本= ×C标准（标准值：10mmol/L）？

　　△A标准/分？

　　试剂：ADH冻干酶粉，缓冲液？

　　正常参考值：<5mmol/L（23mg/dl）？

　　乙醇在体内的代谢：摄入体内的乙醇除小部分在胃内代谢外，绝大部分在肝脏内代谢，仅有2%～10%的乙醇通过肾脏、肺和汗以原形排出体外。在体内，乙醇有三种主要的代谢途径，分别在不同的肝细胞器中进行：①胞浆中的乙醇脱氢酶（ADH）途径；②内质网的微粒体乙醇氧化系统（MEOS）途径；③过氧化体的过氧化氢酶途径。乙醇在体内代谢所具有的相对器官特异性、所产生的高热量（产热29.7kJ/g）以及机体缺乏有效的反馈机制对其在肝脏内代谢速率进行调控，可造成乙醇大量置换肝脏代谢的正常底物（最高可达90%），从而导致肝脏代谢严重紊乱。？

　　在ADH介导的乙醇氧化为乙醛的过程中，氢离子从底物上转移到NAD（氧化型辅酶Ｉ），使其转变为NADH（还原型辅酶Ｉ），于是NAD减少，NADH增多，使胞浆中氧化还原状态（redox）发生变化，表现为乳酸/丙酮酸比值的增高，从而导致一系列的代谢紊乱，如高乳酸血症、酸中毒、高尿酸血症及脂肪肝等。通常，乙醇在肝脏中的代谢大部分是通过细胞浆ADH途径，但肝细胞的微粒体内还存在着一种微粒体乙醇氧化系统（MEOS），亦可使乙醇转化为乙醛。长期饮酒，可诱导该系统P450ⅡE1的产生，使其活性增加4～10倍。它不仅增加乙醛的产生，也产生自由基，导致脂质过氧化作用；更重要的是，P450ⅡE1活化许多异源性物质，产生有毒代谢产物。这些异源性物质包括工业中常用的溶剂、麻醉剂、异烟肼、止痛药、毒品（可卡因）、化学致癌剂、甚至维生素Ａ。在生理条件下，经过氧化体的过氧化氢途径代谢的乙醇只占很小部分。？

　　乙醇及代谢产物的毒性作用机制： 酒精在肝脏中的代谢需多种酶的参与，经若干反应而最后被氧化为二氧化碳及水。在此代谢过程中任一环节出现障碍（如酶的缺乏）均可导致代谢停滞，其中间代谢产物的蓄积可对肝脏造成毒性作用，乙醇本身也对肝细胞有明显的毒性作用。酒精对肝脏的损害除与饮酒量和时间长短有关外，与饮酒的方式也有关，如一次大量饮酒比小量分次饮酒危害性更大。？

　　乙醇对肝脏的损伤：乙醇在肝细胞内代谢产生的毒性代谢产物及其引起的代谢紊乱是导致乙醇性肝损伤的主要原因。乙醇代谢产物损伤作用，除乙醛的化学性损害外，还可引起氧化还原反应的改变、线粒体损害、铁负荷所致肝损害等。乙醇在代谢过程产生大量自由基已明确有两种危害，一是引发肝细胞脂质过氧化反应，造成肝细胞损伤；二是诱导肝脏窦周储脂细胞产生转化生长因子，进而使细胞外基质产生增加，形成肝脏纤维化。此外，乙醇通过细胞色素P450ⅡE1（CYP2E1）、铁、肿瘤坏死因子（TNF）和TNF受体、氧应激、肌纤维母细胞和转化生长因子β1（TGFβ1）的作用诱发肝细胞凋亡。？

　　乙醛对肝脏的损伤：机体摄入的乙醇90%以上在肝脏代谢， 乙醇在体内的代谢过程主要为乙醇-乙醛-乙酸。乙醛已被证实有明显的致癌作用。肝细胞中的乙醛脱氢酶2（ALDH2）的功能是将乙醛氧化成无致癌作用的乙酸，但当其突变后产生变异基因型，就会使该酶失去活性，导致饮酒后乙醛在血液中蓄积。国外研究表明，在东方人中ALDH2活性普遍缺失。吴氏等对 273例正常人进行流行病学调查研究也认为，中国人ALDH2酶的活性普遍缺乏。乙醛可损害各种细胞器和酶的结构功能；又能刺激免疫系统，诱发免疫反应性肝损害；损害线粒体脂肪酸的β氧化，引起脂质过氧化反应，抑制谷胱甘肽（GSH）的生物合成，减弱超过氧化物酶等抗氧化功能，还可延长细胞的增殖周期，并且诱发细胞的凋亡。？

　　急性酒精中毒的临床表现与饮酒量及个体敏感性有关，大致分为三期：①兴奋期：出现头昏，自控力丧失，言语增多，高度兴奋，粗鲁无礼，易感情用事冲动，颜面潮红或苍白。②共济失调期：出现动作不协调，步态蹒跚，语无伦次，眼球震颤，情绪躁动，处于此期的司机易出现幻觉造成车祸。③昏睡期：患者沉睡，颜面苍白，皮肤湿冷，口唇微绀，严重者出现陈氏呼吸，心跳加快，大小便失禁，严重者可以呼吸衰竭而死亡。？

　　结果分析？

　　样本中乙醇含量在13.02～17.36mmol/L时身体有异常变化，样本中乙醇含量<21.7mmol/L为亚临床中毒水平，样本中乙醇含量在26.04～32.55mmol/L时木僵，样本中乙醇含量>35.56mmol/L时沉醉，样本中乙醇含量在44.45～88.9mmol/L时严重中毒，样本中乙醇含量>88.9mmol/L时死亡。？

　　由此可见，乙醇测定对当前人群饮酒影响健康和对社会造成不良危害具有重要意义。？

　　参考文献？

　　1 崔贤维，赵炜，主编。急诊检验与临床。北京：人民军医出版社，2001,10.?

　　2 吴建中，丁建华，高长明，等。江苏汉族人乙醛脱氢酶2基因型分布及其与饮酒习惯的关系。癌变畸变突变，2002,14（2）：90.?